植物细胞工程 实验报告及答案 (胡尚连 尹静)

实验报告配套教材：

书名：植物细胞工程
作者：胡尚连 尹静
出版社：西南交通大学出版社

实验报告概述：

实验一 植物组织培养实验室参观与设计 一、目的要求 　　　通过参观，使学生掌握如何组建植物组织培养实验室；同时，熟悉组培中涉及的各种仪器设备和器皿用具。 二、仪器与用具 　　　1、仪器：超净工作台，高压灭菌锅，冰箱，电炉，显微镜，空调机，电子天平、生化培养箱，烘箱等设备。 　　　2、用具：镊子，剪刀，解剖刀，灭菌器，接种盘，封口膜等各种器械用具和培养瓶，培养皿等各种实验器皿。 三、方法步骤 　　　1、指导老师集中介绍组织培养实验室守则及有关注意事项。 　　　2、指导老师讲解本次实验的目的、仪器设备和器皿用具的名称及实验步骤。 　　　3、指导老师逐一讲解组培实验室的构建情况，包括准备室（又称化学实验室）、缓冲室、无菌操作室、培养室、驯化室、温室等使用的各种仪器设备和器皿用具的名称用途。 1）准备室（化学实验室） 　　　面积：20m2左右 　　　用途：器皿洗涤、培养基配置、分装、高压灭菌，植物材料的预处理，重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析，试管苗出瓶，清洗及整理工作。 　　　要求：明亮、通风 　　　设备：工作台，橱柜，水池，仪器，药品等 2）缓冲室 　　　面积：约3-5m2左右 　　　用途：进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的工作服、拖鞋，戴上口罩。 　　　设备：2盏紫外灯，1个配电板，石英电力时控器等 3）无菌操作室（无菌室，接种室） 　　　面积：10-20m2，视生产规模和超净工作台数量而定。 　　　用途：材料的灭菌接种，无菌材料的继代，丛生菌的增殖或切割，嫩枝扦插生根等，是关键的部分，关系到培养物的污染率、接种工作效率等重要指标。 　　　要求：干爽安静、清洁明亮、墙壁光滑平整不易积染灰尘，地面平坦无缝便于清洗和灭菌。门窗要密闭，一般用移动门窗。 　　　设备：超净工作台、空调机，医用小平车，操作台、搁架、灭菌器等。 4）培养室 　　　面积：视培养架多少及培养物数量而定。 　　　用途：将接种到培养瓶等器皿中的植物材料进行培养的场所。 　　　设备： 　　　（1）培养架与灯光 　　　培养架数目多少视生产规模而定，年产4万~10万苗需4~6个培养架；年产10万~20万苗约需8~10个培养架。每个培养架一般6层，总高度2m，每0.3m为一层,最下一层距离地面0.2m架宽以0.6m为好，架长以40W日光灯的长度来决定，即约1.26m。每层架子安装2盏日光灯。 　　　（2）通风设备 　　　　　在稍高处设置进风气窗，在其对侧近天花板处设置排风窗。 　　　（3）边台、空调机、加湿器（除湿器）、各类显微镜、温湿度计。 5）驯化室 　　　面积：视生产规模而定。 　　　用途：组培苗（试管苗）移栽前进行炼苗。 　　　要求：清洁无菌 　　　设备：空调机、加湿器、恒温恒湿控制仪、喷雾器。 6）温室 　　　面积：视生产规模而定。 　　　用途：保证试管苗不分季节地常年生产。 　　　设备：温度控制装置、通风口、喷雾装置、光照调节装置、杀菌杀虫工具及相应药物。 四、作业 1.将本次实训内容整理成实训报告。 2.高压灭菌锅的工作原理和注意事项？ 3.超净工作台的工作原理是什么？ 4.每人设计一个植物组织培养实验室的组建方案。